哪個更好：手動或自動細胞計數？
細胞計數是許多細胞培養實驗室工作流程的關鍵和常規部分。該實踐通常涉及直接計算小體積中的單個細胞，以便估計較大體積中有多少細胞。這可用於培養維持、設置測定、評估培養中細胞的健康或活力，以及臨床或診斷應用。但是，您何時應該讓機器為您完成細胞計數，從而將您的細胞計數提升到一個新的水平？
手動細胞計數
傳統的細胞計數方法是在台式顯微鏡上使用一種特殊類型的載玻片手動完成的，該載玻片帶有稱為血細胞計數器的網格。研究人員遵循標準化程序來計算單個細胞，並可以使用它來計算每微升培養物中有多少細胞。
“此外，可以通過添加膜排除染料（例如台盼藍）來確定活細胞和死細胞的數量。完整的細胞不會吸收台盼藍，而細胞膜受損的不健康細胞會吸收染料，並且可以在顯微鏡下識別出來，”默克公司監測工俱全球產品經理 Mahesh Dodla 說。這對於獲得更準確的計數和評估培養物的健康狀況很有用，也是自動細胞計數係統中採用的一種技術。
自動細胞計數
自動化系統通常依賴於基於成像的方法或基於阻抗的方法。基於成像的系統使用顯微鏡和相機捕獲圖像，然後使用算法對細胞進行計數。同時，基於阻抗的系統測量電阻以確定電池的數量。
使用基於圖像的方法的細胞計數器可以進一步分為熒光或明場成像。“基於標籤的方法是最常見的，因為它最可靠，”安捷倫科技全球科學項目經理 Joe Clayton 說。
系統在插入樣本的方式上有所不同；一些使用特殊的一次性載玻片，而另一些則可以在試管或微孔板中一次採集多個樣本。但在每種情況下，讓機器進行計數都會消除“人眼的主觀和耗時的判斷，取而代之的是更加客觀、快速和準確的技術，”Logos Biosystems 首席執行官 Neon Jung 分享道。
自動細胞計數適用於大多數細胞類型，但通常需要懸浮細胞。“一個巨大的挑戰可能是尺寸的極限，尤其是較小的細胞。因此，如果您研究非哺乳動物類型的細胞，例如細菌或酵母細胞計數，可能會遇到挑戰，”克萊頓說。
其他會給自動計數器帶來挑戰的細胞包括不能很好地保留污漬的細胞，例如免疫細胞。也許最困難的是聚集在一起的細胞。成簇的細胞對基於圖像和基於阻抗的系統都造成了挑戰。“在這種情況下，對聚集細胞進行準確細胞計數的軟件算法對於準確性非常重要，”Jung 說。
還值得注意的是，一些細胞計數器提供的不僅僅是計數。它們還可以提供有關細胞活力、直徑、活/死計數、培養圖像和熒光強度的信息。“一些儀器，如 Logos Bio 的 LUNA FL，使用熒光信息提供轉染效率信息，”Jung 說。
手動與自動細胞計數
手動和自動細胞計數之間的主要考慮因素是成本、勞動力和準確性。
成本方面，手動細胞計數只需要一次性購買幾件物品。反之，僅系統自動計數器的運行成本就在幾千到幾萬美元之間，並且還需要消耗品購買和維護成本。
除了進行手動計數的最快和最熟練的科學家外，自動計數器比所有計數器都快。但即使對於那些能夠快速手動計數細胞的人來說，“你確實有增加的走動時間。因此，特別是如果您有大量樣本，點擊 Go、走開和顯示讀數的能力對人們來說非常有用，”Clayton 指出。
自動化系統在準確性方面的主要優勢在於它消除了用戶之間或實驗室之間的差異。這種可重複性對於依賴一定數量的細胞作為輸入的分析或方案非常重要。
第二個精度優勢是自動化系統通常使用比血細胞計數器更大的視野。“如果你進入較少數量的細胞或較低濃度的細胞，那麼更大的視野肯定會對傳統的手動方法產生好處，”克萊頓說。
自動細胞計數器什麼時候值得？
Clayton 建議考慮如何使用該系統，“對於大多數項目，這是由許多個人在實驗室中例行完成的事情嗎？如果答案是肯定的，我認為考慮使用自動化系統是有意義的。如果實驗室涉足細胞培養，有人去那裡做計數，你知道，每週幾次，可能沒有理由得到一個細胞計數係統，或者至少是一個更複雜的系統。”
在您計算細胞的工作流程中，準確性和可重複性的重要性也值得考慮。以及如果您可以獲得一個有助於您工作流程的其他部分的系統。
考慮使用自動細胞計數儀時要考慮什麼
“選擇細胞計數器時首先要考慮的是樣本類型和應用。在主要使用永生化細胞系的實驗室中，不需要熒光細胞計數器。但這在培養原代細胞的實驗室中是必不可少的，”Jung 建議道。
接下來，實驗室應考慮一次需要計數的樣本數量，並查看哪些系統將滿足其在通量方面的需求。
然後他們還應該考慮每個系統的準確性和計數方法以及系統可能提供的任何附加功能。“我認為另一個非常重要的考慮因素是：是否有可能獲得具有多功能的集成系統。因此，它不僅僅是一個專用的細胞計數係統，而且將細胞計數作為其眾多功能之一，”Clayton 說。
最終，獲得自動細胞計數器以及選擇哪一個的決定在很大程度上取決於實驗室。仔細研究一下您的實驗室目前正在做什麼以及實驗室的長期需求將走向何方可能會很有用。
