選擇 ELISA 讀板機
ELISA 讀板儀曾經僅限於測量 96 孔微孔板的吸光度。但技術已經向前發展。現在,研究人員可以使用具有旨在簡化實驗工作流程的功能的多模式儀器。這篇社論著重於為您的實驗室選擇 ELISA 酶標儀時需要考慮的一些因素。
單一分析物吸光度測試經受住了時間的考驗
幾十年來,在 96 孔微孔板中進行單一分析物測定以產生比色讀數一直是最受歡迎的 ELISA 格式。這主要是因為它們的配置相對簡單,並且可以使用實驗室中已有的儀器和試劑進行測量。然而,這些類型的測定有其限制。 「許多研究人員沒有意識到吸光度測定通常提供最低的靈敏度和測定性能,並且可以使用更好的技術,」Promega 公司的高級產品經理 Michael Bjerke 報告說。 “值得注意的是,以螢光和發光為中心的技術開闢了新的檢測可能性,這是基於吸光度的方法無法實現的。”
ELISA 讀板機需要考慮的功能
如果您打算購買新的 ELISA 酶標儀,有多種選擇可供選擇。為了幫助指導您的決策,值得研究以下儀器功能。
靈敏度和動態範圍
靈敏度和動態範圍是用於描述 ELISA 酶標儀功能的兩個關鍵性能指標。其中,靈敏度是指可以準確檢測到的分析物有多少,由所使用的儀器和檢測方法共同決定。 「靈敏的儀器與靈敏的檢測相結合,可以檢測樣品中極低濃度的分析物,」Azure Biosystems 的應用科學家 Joy De Torres 解釋道。 “實際上,高靈敏度可能意味著在樣品材料中發現稀有分析物,或者可以提供疾病生物標記的早期檢測。”
相反,動態範圍與特定光學模式下可能的測量範圍有關。 「由於您無法始終預測哪些實驗樣品會在檢測板中產生高訊號或低訊號,因此寬廣的線性動態範圍對於能夠有效測量兩個訊號極值非常重要,」Bjerke 指出。 BMG Labtech 北美銷售副總裁 Eric Matthews 呼應了這一點,他補充說,配備動態範圍擴展功能的 ELISA 酶標儀可以節省研究人員的時間,因為無需稀釋樣品或執行高濃度的重複測試井。
多模能力
多模式 ELISA 酶標儀可在一台儀器上記錄多種不同類型的測量結果。 「如果需要利用基於吸收、螢光和發光的檢測技術,那麼與擁有多個獨立儀器相比,使用多模式讀取器可以節省空間和成本,」安捷倫科技公司應用科學家Peter J. Brescia, Jr 評論道。 “此外,多模式讀取器無需將產生多種讀數的測定從一台儀器轉移到另一台儀器,這可能會引入額外的變異源並增加板意外掉落的風險。”
「在吸光度 ELISA 是唯一潛在用例的情況下,而且該專案的持續時間有限,投資於比將要使用的模式更多的模式是一種資本預算的浪費,」Matthews 說。 「但是,如果實驗室將來可能嘗試新方法,並計劃使用讀取器進行數量不定的研究項目(這種情況更常見),那麼用戶幾乎永遠不會後悔購買多模式儀器。一旦您有能力檢測吸光度以外的讀數,您很快就會找到將這些讀數引入您的研究的方法。
使用方便
易用性是選擇 ELISA 讀板機時要考慮的關鍵因素,因為它會影響工作流程效率。 「只需最少的培訓即可啟動並運行儀器,這是避免研究不必要的延誤的關鍵,」布雷西亞說。 “通常,將根據需要為超級用戶或實驗室工作人員/經理保留允許使用高級功能的進一步培訓。”擁有直覺的系統對於確保數據準確性也至關重要。 「透過降低操作員錯誤的風險,使用者友好的儀器可以極大地提高實驗結果的品質和可重複性,」德托雷斯指出。
「自動」一詞越來越多地被用來推斷易用性,但比耶克警告研究人員要找出這在實際中意味著什麼。 「許多 ELISA 讀板機都提供自動增益調整功能,可根據來自測定孔的訊號強度範圍優化偵測器,」他解釋道。 「但是,在大多數讀板器上,此功能實際上需要一定程度的使用者介入才能正常運作。相比之下,GloMax ®讀碼器為每個樣本提供真正的自動增益調整,因此無需手動幹預。
綜合數據分析
整合數據分析無需從 ELISA 讀板機手動傳輸數據,這意味著工作流程更加簡化,獲得結果的速度更快,出錯的機會更少。在某些情況下,例如 GMP 實驗室,甚至可能強制要求進行機載資料分析。 「透過 ELISA,使用者通常希望根據標準曲線的值查看分析物的確定濃度,」Matthews 解釋道。 “整合數據分析軟體意味著他們可以在測試完成後立即獲取這些數據,從而騰出時間來執行其他任務。”
與自動化的兼容性
對於需要更高通量的實驗室來說,與自動化的兼容性非常重要。 「自動化使用的儀器通常更快、更靈活,因為它們一旦安裝就更難修改,」布雷西亞說。 「鑑於可以進行的檢測範圍很廣,這是多模式讀取器大放異彩的領域。然而,在某些大規模運行特定測定的情況下,專用的單模式讀取器可能是可行的選擇。無論哪種情況,就吞吐量而言,通常首選高性能、自動化的讀取器。
額外積分
除了剛才提到的所有因素之外,在選擇 ELISA 讀板機時,您還需要考慮板格式和成本。 「總的來說,ELISA 酶標儀上不同功能的重要性將取決於實驗室最常進行的實驗的具體需求,」De Torres 說。此外,您還需要從儀器製造商那裡了解您今後可以獲得什麼程度的支援。 「選擇任何儀器時,技術支援都是一個關鍵因素,」Bjerke 建議。 「您所希望的只是讓您的檢測發揮作用並產生結果,但問題總是會發生。強大的技術支援團隊可以快速準確地診斷問題並幫助您解決問題,使您的專案步入正軌。
文章作者-Emma Easthope
Emma Easthope 是英國 Cambridge Technical Content Ltd 的創始人兼董事。她現在製作了廣泛的科學內容,包括 Biocompare 的常規專題。