HPLC/UPLC系統流路清洗

你有遇到壓力異常、化合物滯留時間(RT)異常、峰型失真等狀況?

在日復一日的分析中殘留的樣品、緩衝液或污染物會逐漸累積；也或者是系統長時間閒置後新使用，溶劑揮發造成樣品、鹽類等化合物析出；這通常是這些狀況的主因。

那要如何進行故障排除呢? 通常使用混合有機溶劑（如水、乙腈、甲醇、異丙醇）進行，並需拆下管柱、執行 Wet Prime 和 Purge Injector 等操作，最後再以純水沖洗並恢復正常流動相。這樣能有效去除殘留樣品與污染物，保持系統穩定。

🧴 標準清洗流程（以 Waters ACQUITY / Alliance 系列為例）

1. 準備清洗溶液

○ 配製 水:乙腈:甲醇:異丙醇 = 1:1:1:1，並加入 0.1% 甲酸。

○ 此溶液可同時用於流路與進樣器(Injector)清洗。

2. 對管路

○ 將 A、B、C、D 溶劑管路及Purge管路放入清洗溶液。

○ 執行 Wet Prime，確保泵體與管路充滿溶液。

○ 執行 Purge Injector，避免進樣器有殘留。

3. 拆除管柱

○ 移除管柱，改接上連通管（union）。

○ 將出口管線接至廢液瓶，避免污染 QDa 或其他檢測器。

4. 設定清洗方法

○ 建立方法：溶劑比例 A:B:C:D = 25:25:25:25。

○ 流速設為 0.5 mL/min，運行時間 10 分鐘。

○ 建立樣品組，進行最大進樣體積(若安裝了加長進樣環則為 50 µL，若未安裝則為 10 µL，Alliance 2695 則為 100 µL）的多次進樣（如 30 次）。

5. 恢復系統

○ 清洗完成後，以純水清洗灌滿整個系統。

○ 最後切換回正常流動相，恢復分析。

⚠️ 注意事項

• 避免鹽類沉積：若移動相溶液使用緩衝液，清洗時務必先用水沖洗，避免鹽析堵塞泵或檢測器。

• 壓力控制：清洗流速不宜過快，避免瞬間壓力波動。

• 定期清洗：建議每週或更換流動相時執行一次完整清洗。

• 燈源與檢測器保養：清洗後檢查 UV 檢測器流通池是否乾淨，避免基線噪音。

📋 HPLC/UPLC 日常維護要點

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